User:Margarida Azevedo/Notebook/Margarida Azevedo/2010/05/04
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Entry title"Vectores" Os vectores de DNA permitem a replicação, transporte e/ou expressão de segmentos de DNA de interesse para células alvo. Os vectores mais frequentemente utilizados são vectores plasmídicos, moléculas de DNA circulares derivadas de sequências de DNA bacteriano extra-cromossómico e modificadas para incluir elementos genéticos de interesse. 1. Quais as características básicas que um vector plasmídico deve ter? Vector permite transportar cópias de DNA. - Origem de replicação - Sítios de clivagem de enzimas de restrição (multiple cloning site, local de policlonagem) - gene de resistência a um fármaco para poder haver selecção das células do hospedeiro 2. Os vectores podem ser representados pela sua sequência de DNA ou por mapas que incluem a indicação dos elementos mais relevantes presentes no vector. Pesquise no google imagens dos vectores pUC, pGEX, pcDNA, pEGFP e o sistema pTre/pTet-On. Que diferentes características apresentam estes vectores e para que servem? pUC - vector procariótico pGEX - proteína fica ligada ao GST, forma-se proteína de fusão.PROCARIÓTICO pcDNA - resistência à neomicina (vai ser selecionado), vai permitir produzir rnamensageiro em células eucarióticas. EUCARIÓTICO. permite fazer clonagem em bactérias, purificá-lo e dps continuá-lo em células eucarióticas. pEGFP - proteína fluorescente verde. Podemos estudar células vivas e estudar proteínas de interesse.
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