User:Gaston Paris/Notebook/Cloando FliM/2008/08/12

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Precipitación y digestión para clonar

10 μL de cada una de las siguientes purificaciones por glass milk: PCR recombinantes 1, 2 y 3; L1,2 y S1,2; MWM: 1Kb y movil19
  • A las PCR S1,2 y L1,2 les agregué 150μL de agua.
  • Hice una extracción con cloroformo
  • Precipite con Isopropanol + AcNa 0,3M
  • 25' a 13.000 rpm
  • Lavé con 200μL de EtOH 70%
  • Resuspendí el ADN en 14μL

Digerí con NdeI y BamHI

ADN 14μL
NEBuffer3 10X 2μL
BSA 1/10 2μL
NdeI 1μL
BamHI 1μL

2 hs a 37°C

Corrí un gel y corte las bandas y purifiqué poe glass milk casero.

Corrí un gel con 10μL de la purificación.

Conclusión: Esta para clonar R3 y S1,2. Repetir para R1, R2 y L.