Nuclear Gene HS Takara PCR Optimization
HS Takara RXN Mixture 3.0ul Instagene
|
conc
|
1X
|
5.5
|
'
|
Milli Q water |
|
3.1 |
17.05 |
|
Takara HS Buffer |
10X |
2 |
11 |
|
dNTP |
2.5uM |
0.8 |
4.4 |
|
Primer Mix |
20uM |
1 |
|
|
HS Taq |
5U |
0.1 |
0.55 |
|
Template |
Instagene |
3 |
16.5 |
|
|
|
|
49.5 |
9.0ul / RXN
|
|
|
|
|
add 1.0ul Primer
|
HS Takara RXN Mixture 4.0ul Instagene |
conc |
1X |
5.5 |
|
Milli Q water |
|
2.1 |
11.55 |
|
Takara HS Buffer |
10X |
2 |
11 |
|
dNTP |
2.5uM |
0.8 |
4.4 |
|
Primer Mix |
20uM |
4 |
|
|
HS Taq |
5U |
0.1 |
0.55 |
|
Template |
Instagene |
4 |
22 |
|
|
|
|
49.5 |
9.0ul / RXN
|
|
|
|
|
add 1.0ul Primer
|
A PCR cycle |
|
|
|
|
98C |
10 sec |
|
|
|
60C |
1 min |
|
|
|
x35 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
AMP Lane |
Template |
Primer |
Amt of Template |
|
1 |
3 Instagene |
A2 |
3 |
|
2 |
3 Instagene |
A3 |
3 |
|
3 |
3 Instagene |
A4 |
3 |
|
4 |
3 Instagene |
A5 |
3 |
|
5 |
3 Instagene |
A6 |
3 |
|
6 |
4 Instagene |
A2 |
3 |
|
7 |
4 Instagene |
A3 |
3 |
|
8 |
4 Instagene |
A4 |
3 |
|
9 |
4 Instagene |
A5 |
3 |
|
10 |
4 Instagene |
A6 |
3 |
|
11 |
3 Instagene |
A2 |
4 |
|
12 |
3 Instagene |
A3 |
4 |
|
13 |
3 Instagene |
A4 |
4 |
|
14 |
3 Instagene |
A5 |
4 |
|
15 |
3 Instagene |
A6 |
4 |
|
16 |
4 Instagene |
A2 |
4 |
|
17 |
4 Instagene |
A3 |
4 |
|
18 |
4 Instagene |
A4 |
4 |
|
19 |
4 Instagene |
A5 |
4 |
|
20 |
4 Instagene |
A6 |
4 |
|
21 |
AV 2ng |
A2 |
1 |
|
22 |
AV 2ng |
A3 |
1 |
|
23 |
AV 2ng |
A4 |
1 |
|
24 |
AV 2ng |
A5 |
1
|
25 |
AV 2ng |
A6 |
1
|
|
|
|
|
*AV 1ng Positive Control |
|
|
|
Load 2.0ul Sample
AV 1ng control failed - bad DNA dilution
Dye Dilution Test
1:10
Dye Stock : MilliQ Water
From 06May10 PCR - samples 1-10
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