User:Alexander S Mikheyev/Notebook/rotifer alien genes/2010/04/21

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Nuclear Gene HS Takara PCR Optimization

Mix A : HS Takara RXN Mixture conc 1X 6.5 '
Milli Q water 3.1 20.15
Takara HS Buffer 10X 2 13
dNTP 2.5uM 0.8 5.2
Primer Mix 20uM 4
HS Taq 5U 0.1 0.65
Template Instagene 2 13
52 8.0ul / RXN
Mix B : HS Takara RXN Mixture conc 1X 6.5
Milli Q water 3.1 20.15
Takara HS Buffer 10X 2 13
dNTP 2.5uM 0.8 5.2
Primer Mix 20uM 3
HS Taq 5U 0.1 0.65
Template Instagene 2 13
52 7.0ul / RXN
Mix C : HS Takara RXN Mixture conc 1X 6.5
Milli Q water 3.1 20.15
Takara HS Buffer 10X 2 13
dNTP 2.5uM 0.8 5.2
Primer Mix 20uM 4
HS Taq 5U 0.1 0.65
Template Instagene 2 13
52 6.0ul / RXN
A PCR cycle
95C 3 min
95C 5 sec
60C 1 min
x35
*AV 1ng Positive Control
AMP Lane Template 2.0ul Primer AMP Lane Template 3.0ul Primer AMP Lane Template 4.0ul Primer
1 71 Instagene A1 19 71 Instagene A1 37 71 Instagene A1
2 71 Instagene A2 20 71 Instagene A2 38 71 Instagene A2
3 71 Instagene A3 21 71 Instagene A3 39 71 Instagene A3
4 71 Instagene A4 22 71 Instagene A4 40 71 Instagene A4
5 71 Instagene A5 23 71 Instagene A5 41 71 Instagene A5
6 71 Instagene A6 24 71 Instagene A6 42 71 Instagene A6
7 72 Instagene A1 25 72 Instagene A1 43 72 Instagene A1
8 72 Instagene A2 26 72 Instagene A2 44 72 Instagene A2
9 72 Instagene A3 27 72 Instagene A3 45 72 Instagene A3
10 72 Instagene A4 28 72 Instagene A4 46 72 Instagene A4
11 72 Instagene A5 29 72 Instagene A5 47 72 Instagene A5
12 72 Instagene A6 30 72 Instagene A6 48 72 Instagene A6
13 AV 1ng A1 31 AV 1ng A1 49 AV 1ng A1
14 AV 1ng A2 32 AV 1ng A2 50 AV 1ng A2
15 AV 1ng A3 33 AV 1ng A3 51 AV 1ng A3
16 AV 1ng A4 34 AV 1ng A4 52 AV 1ng A4
17 AV 1ng A5 35 AV 1ng A5 53 AV 1ng A5
18 AV 1ng A6 36 AV 1ng A6 54 AV 1ng A6

Loaded 2.0ul Sample

21April10A.jpg

Reran Control PCR product from above - sample PCR Program

Loaded 2.0ul Sample

21April10B.jpg