User:Alexander S Mikheyev/Notebook/rotifer alien genes/2010/04/05

From OpenWetWare
Jump to: navigation, search
OpenWetWare photo.jpg Alien genes Report.pngMain project page
Resultset previous.pngPrevious entry      Next entryResultset next.png

Alien Genes New Primer Screen

Reaction mixture conc. 1x x32.5 ' Lane Gene Lane Gene
Temp (Ithaca1 C3, 62) ?? 2 65 1 AV10158 17 AV10084
TopTaq Buffer 10x 1 32.5 2 AV10153 18 AV10082
dNTP mix 10 mM each 0.2 6.5 3 AV10151 19 AV10075
Primer mix 5 uM each 1 4 AV10150 20 AV10071
TopTaq 5 U/ul 0.05 1.625 5 AV10140 21 AV10045
Milli Q 5.75 186.875 6 AV10134 22 AV10043
10 ul 7 AV10130 23 AV10042
8 AV10123 24 AV10041
PCR cycle 9 AV10121 25 AV10034
94C 3 min 10 AV10104 26 AV10028
11 AV10109 27 AV10027
98C 10 sec 12 AV10099 28 AV10025
60C 3 min 13 AV10098 29 AV10016
x35 14 AV10094 30 AV10011
15 AV10092 31 AV10007
72C 5 min 16 AV10089 32 AV10002

Loaded 2.5ul of each sample

0060-1.jpg


Alien Genes LongPCR

Amplification of TEL_L_A

' [CONC] 1X 2 '
Water 5.3 10.6
Takara LA Taq 5U 0.1 0.2
Takara LA Buffer 10X 1 2
dNTP 2.5uM each 1.6 3.2
*Template 1ng 1 2
Primer Mix 5uM each 1
10.0ul 18 9.0ul/RXN
add 1.0 Primer Mix
* AV or CCA3
PCR Cycle
94C 1 min
98C 10 sec
65C 15 min
30X
AMP Lane Template MIX Contents ' Size Fosmid
1 AV 137 AV10083 FWD AV10084 RVS 5400 AV TEL L B
2 AV 138 AV10083 FWD AV10084.2 RVS AV TEL L B
3 CCA3 137 AV10083 FWD AV10084 RVS 5400 AV TEL L B
4 CCA3 138 AV10083 FWD AV10084.2 RVS AV TEL L B

Loaded 1ul of each sample

05April10.jpg