MOLDIAG:Syllabus: Difference between revisions
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==Conteúdos programático== | |||
===Introdução ao diagnóstico molecular em medicina=== | |||
*Doenças monogénicas | |||
*Doenças poligénicas | |||
*Biologia forense | |||
#CODIS | |||
#STRs | |||
* Tipagem HLA | |||
#Tipagem Celular por FACS | |||
#Genotipagem por PCR | |||
# Genotipagem por Microarrays | |||
*Farmacogenómica | |||
#Citocromo P450 | |||
*Susceptibilidade a doenças infecciosas | |||
#Susceptibilidade genética: SCID | |||
#Resistência genética: HIV | |||
*Doenças infecciosas | |||
#Virologia | |||
# Bacteriologia | |||
#Resistência aos antibióticos | |||
*Epidemiologia molecular | |||
# Filogenética | |||
# Fingerprinting (genotipagem) | |||
===Bases Biológicas do Diagnóstico Molecular=== | |||
*Estrutura do DNA e RNA | |||
#Organização do DNA | |||
# RNAs codificantes e não codificantes | |||
# RNA de interferência | |||
*Expressão genética e síntese proteica | |||
#Transcrição | |||
#Maquinaria de transcrição procariótica e eucariótica | |||
#Edição do RNA | |||
#Síntese proteica | |||
#Modificações pós-translacionais | |||
===Ferramentas do Diagnóstico Molecular=== | |||
*Enzimas que modificam ácidos nucleicos | |||
*Sistemas e vectores de clonagem | |||
#Plasmídeos | |||
#Cosmídeos e fagmídos | |||
# YACs, BACs | |||
#Transformação, conjugação, transfeção e electroporação | |||
*Sistemas de selecção de recombinantes | |||
#Antibióticos | |||
# Sistemas auxotróficos | |||
#Proteínas fluorescentes | |||
*Sistemas de produção de proteínas recombinantes | |||
*Bibliotecas genómicas (genotecas) | |||
*Hibridação de ácidos nucleicos | |||
# Southern blotting | |||
#Northern blotting | |||
====Métodos da baseados na Polimerase==== | |||
*Amplificações pela polimerase | |||
#RFLP-PCR | |||
#RAPD-PCR | |||
#Multiplex PCR | |||
# PCR Multiplex alelo específico | |||
#PCR Longo | |||
# PCR Competitivo | |||
#PCR colony | |||
#Touchdown (gradiente) e Hot Start | |||
# PCR Degenerado | |||
#PCR In situ | |||
# PCR Inverso | |||
# RACE | |||
#Nested PCR | |||
#RT-PCR / RT-PCR | |||
# Methylation Spectific PCR (MS-PCR) | |||
*PCR em tempo real | |||
#Conceitos | |||
#Syber-green | |||
#Sondas | |||
#Curvas de calibração e quantificação | |||
====Métodos baseados na Ligase e MLPA==== | |||
*Aplicações pela ligase | |||
#LCR | |||
#MLPA | |||
*Métodos especiais | |||
# DNA ramificado (bDNA) | |||
#Ribotipagem | |||
===Fundamentos de fluorescência=== | |||
*Espectro electromagnético da luz visível | |||
#Amplitude de onda | |||
# Comprimento de onda | |||
# Frequência | |||
*Fluoróforos | |||
#Estado fundamental | |||
#Estado excitado | |||
*Diagrama de Jablonski | |||
# Lei de Kasha | |||
#Lei de Planck | |||
#Desvio de Stokes (Stokes shift) | |||
#FRET - Förster resonance energy transfer | |||
#Cromóforos e fluoróforos | |||
#Quenching | |||
#Detecção in vivo da interacção de proteínas | |||
#Sondas moleculares | |||
*Microscopia | |||
#Fluoróforos usados em microscopia | |||
# Photobleaching (decaimento) | |||
#Métodos para minimizar o decaimento | |||
#Filtros | |||
#Espelhos dicróicos | |||
#Microscopia de fluorescência | |||
#Microscopia confocal | |||
===Métodos de fluorescência em citogenética=== | |||
*Citogenética clássica vs citogenética convencional | |||
#Hibridação in situ | |||
#Sondas e DNA alvo | |||
## Desnaturação | |||
## Renaturação / hibridação | |||
*Preparação da amostra | |||
#Tipos de material biológico | |||
#Fixação | |||
#Pré-tratamento das lâminas | |||
*Tipos de sonda | |||
#Sequência repetitiva | |||
#Single copy sequences | |||
#Chromosome paiting | |||
*Marcação das sondas | |||
#Random primed labelling | |||
#PCR | |||
*Imunodectecção | |||
#Marcação directa vs marcação indirecta | |||
#Amplificação de sinal | |||
#Método ABC | |||
#Método Streptavidina-biotina | |||
*Técnicas especiais de FISH | |||
#SKY-FISH | |||
# Zoo-FISH | |||
# Fiber-FISH | |||
# PRINS | |||
# CGH | |||
#PNA-FISH | |||
# DNA microarrays / CGH microarrays | |||
#Flow-cytometry FISH | |||
===Diagnóstico citogenético=== | |||
====Citogenética médica clássica==== | |||
====Citogenética de interfase==== | |||
===Genética médica=== | |||
===Diagnóstico molecular hemáto-oncológico=== | |||
===Diagnóstico molecular de doenças infecciosas=== | |||
===Diagnóstico pré-natal=== | |||
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