Alien Genes New Primer Screen
| Reaction mixture
|
conc.
|
1x
|
x32.5
|
'
|
Lane
|
Gene
|
Lane
|
Gene
|
| Temp (Ithaca1 C3, 62) |
?? |
2 |
65 |
|
1 |
AV10158 |
17 |
AV10084
|
| TopTaq Buffer |
10x |
1 |
32.5 |
|
2 |
AV10153 |
18 |
AV10082
|
| dNTP mix |
10 mM each |
0.2 |
6.5 |
|
3 |
AV10151 |
19 |
AV10075
|
| Primer mix |
5 uM each |
1 |
|
|
4 |
AV10150 |
20 |
AV10071
|
| TopTaq |
5 U/ul |
0.05 |
1.625 |
|
5 |
AV10140 |
21 |
AV10045
|
| Milli Q |
|
5.75 |
186.875 |
|
6 |
AV10134 |
22 |
AV10043
|
|
|
10 ul |
|
|
7 |
AV10130 |
23 |
AV10042
|
|
|
|
|
|
8 |
AV10123 |
24 |
AV10041
|
| PCR cycle |
|
|
|
|
9 |
AV10121 |
25 |
AV10034
|
| 94C |
3 min |
|
|
|
10 |
AV10104 |
26 |
AV10028
|
|
|
|
|
|
11 |
AV10109 |
27 |
AV10027
|
| 98C |
10 sec |
|
|
|
12 |
AV10099 |
28 |
AV10025
|
| 60C |
3 min |
|
|
|
13 |
AV10098 |
29 |
AV10016
|
| x35 |
|
|
|
|
14 |
AV10094 |
30 |
AV10011
|
|
|
|
|
|
15 |
AV10092 |
31 |
AV10007
|
| 72C |
5 min |
|
|
|
16 |
AV10089 |
32 |
AV10002
|
Loaded 2.5ul of each sample
Alien Genes LongPCR
Amplification of TEL_L_A
| '
|
[CONC]
|
1X
|
2
|
'
|
| Water |
|
5.3 |
10.6 |
|
| Takara LA Taq |
5U |
0.1 |
0.2 |
|
| Takara LA Buffer |
10X |
1 |
2 |
|
| dNTP |
2.5uM each |
1.6 |
3.2 |
|
| *Template |
1ng |
1 |
2 |
|
| Primer Mix |
5uM each |
1 |
|
|
|
|
10.0ul |
18 |
9.0ul/RXN
|
|
|
|
add 1.0 Primer Mix |
|
|
|
|
|
|
| * AV or CCA3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| PCR Cycle |
|
|
|
|
| 94C |
1 min |
|
|
|
| 98C |
10 sec |
|
|
|
| 65C |
15 min |
|
|
|
|
30X |
|
|
|
| AMP Lane
|
Template
|
MIX
|
Contents
|
'
|
Size
|
Fosmid
|
| 1 |
AV |
137 |
AV10083 FWD |
AV10084 RVS |
5400 |
AV TEL L B
|
| 2 |
AV |
138 |
AV10083 FWD |
AV10084.2 RVS |
|
AV TEL L B
|
| 3 |
CCA3 |
137 |
AV10083 FWD |
AV10084 RVS |
5400 |
AV TEL L B
|
| 4 |
CCA3 |
138 |
AV10083 FWD |
AV10084.2 RVS |
|
AV TEL L B
|
Loaded 1ul of each sample
|
Alien genes
