User:Iolanda S. O. Santos/Notebook/Caderno de Apontamentos/2010/04/20

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Exercício TP5
Protocolo: Técnica: PCR
 * Proponha com detalhe adequado um procedimento experimental que permita a identificação das mutações presentes no gene da beta-globina na família do nosso caso de estudo.

Material/Reagentes: Mix: H2O, solução tampão (contém MgCl2), dNTP's, primers e DNApolimerase

10x Solução tampão, mix dNTP, Forward and Reverse Primer, DNA, DNA polimerase, H2O

Síntese do primer à mão ou informatica/:

Desenhar à mão - identificamos no gene as 2 mutações da maria e escolhemos 20 nucleotidos a 5' e a 3' para a síntese de primers. A 5' o primer terá a mesma sequencia que a cadeia 3'->5' do DNA. A 3' o primer será complementar à 3'->5'.

Informaticamente: ncbi ou primer3

Procedimento:

Proponha com detalhe adequado um procedimento experimental que permita o estudo da expressão do gene da beta-globina na família do nosso caso de estudo.

RT-PCR


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